ELISA實驗中需注意事項及操作步驟！
ELISA試劑盒實驗中出現各種問題，如果能提前知道一些關于elisa實驗的要領就可以正確的避免這些問題的出現，BUNSEN本生總結問題：
1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結果更穩定。
4、ELISA試劑盒實驗時，要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數據的準確性。
10、ELISA試劑盒對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚，即加標本，加酶物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行發作氣泡。加標本通常用微量加樣器，按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以發作穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清，可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其參加血清標本，然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶物使用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液進程迅速完結。在雙抗體夾心法測定抗原時，如使用對于抗原分子上兩個不一樣抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體。
ELISA試劑盒則在測守時可使標本的參加和酶標抗體的參加兩步并作一步。這種雙位點一步不光簡化了操作，縮短了反應時間，如使用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也明顯進步。單克隆抗體的使用使測定抗原的ELISA試劑盒進步到新水平。
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